I C S 6 5.0 2 0.2 0C C S B 1 6黑 龙 江 省 地 方 标 准D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 2旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性鉴 定 技 术 规 程2 0 2 2-0 1-2 9 发 布2 0 2 2-0 2-2 8 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局发 布DB23D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 2I前 言本 文 件 按 照 G B/T 1.1-2 0 2 0 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分：标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的规 定 起 草。请 注 意 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利。本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 专 利 的 责 任。本 文 件 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出。本 文 件 起 草 单 位：黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 生 物 技 术 研 究 所。本 文 件 主 要 起 草 人：张 国 民、马 军 韬、邓 凌 韦、宋 显 东、王 春 荣、司 兆 胜、胡 亚 军、王 永 力、张 齐 凤、高 洪 儒、张 君、王 南 博、任 洋。D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 21旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 规 程1 范 围本 文 件 规 定 了 旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 的 相 关 术 语 和 定 义、环 境 条 件、鉴 定方 法、评 价 标 准 和 技 术 档 案。本 文 件 适 用 于 水 稻 稻 瘟 病 田 间 抗 性 鉴 定。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。其 中，注 日 期 的 引 用性 文 件，仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件；不 注 日 期 的 引 用 文 件，其 最 新 版 本（包 括 所 有 的 修 改单）适 用 于 本 文 件。N Y/T 3 2 5 7 水 稻 稻 瘟 病 抗 性 室 内 离 体 叶 片 鉴 定 技 术 规 程N Y/T 3 6 8 5 水 稻 稻 瘟 病 抗 性 田 间 监 测 技 术 规 程D B 2 3/T 2 7 3 5 水 稻 穗 颈 瘟 人 工 接 种 鉴 定 技 术 规 程3 术 语 与 定 义下 列 术 语 与 定 义 适 用 于 本 文 件。3.1旱 晚 播用 于 繁 殖 病 原 菌 的 蒙 古 稻 或 其 他 易 感 病 水 稻 品 种，采 取 晚 播 种、旱 育 苗 的 田 间 管 理 方 式。3.2活 体 接 种在 适 宜 条 件 下，将 病 原 菌 接 种 至 水 稻 活 体 幼 苗，并 以 发 病 的 水 稻 活 体 幼 苗 为 发 病 中 心，自 然 传染 供 试 水 稻 品 种（材 料）进 行 田 间 抗 病 性 鉴 定 的 操 作 方 式。4 环 境 条 件田 间 平 均 温 度 在 2 2 2 8 之 间，平 均 相 对 湿 度 8 0%，遮 住 太 阳 的 直 射 光，以 散 射 光 为 主。5 鉴 定 方 法5.1 建 立 病 原 菌 繁 殖 圃5.1.1 病 原 菌 的 繁 殖以 蒙 古 稻 或 其 他 当 地 易 感 水 稻 品 种 作 为 活 体 寄 主 品 种，水 稻 稻 瘟 病 菌（P y r i c u l a r i a o r y z a e）的分 离、培 养 按 照 N Y/T 3 2 5 7 的 规 定 执 行。D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 225.1.2 病 原 菌 繁 殖 圃 的 建 立旱 育：选 择 土 质 肥 沃、具 有 喷 灌 和 遮 阴 设 施 的 地 点 建 立 病 原 菌 繁 殖 圃，面 积 与 鉴 定 病 圃 比 例 为1：6 0。病 原 菌 繁 殖 圃 做 旱 床，较 常 规 多 施 氮 肥 3 0%，蒙 古 稻 播 种 量 约 芽 种 6 0 0 g/,播 种 前 浇 透 底水，播 种 后 覆 土、覆 盖 地 膜,同 时 加 扣 纱 网 式 遮 阴 棚。晚 播：叶 瘟 鉴 定 时，病 原 菌 繁 殖 圃 和 叶 瘟 鉴 定 圃 播 种 时 间 一 致，6 月 1 0 日 前 播 种；穗 颈 瘟 鉴 定时，病 原 菌 繁 殖 圃 播 种 时 间 也 是 6 月 1 0 日 前 完 成 播 种。5.1.3 病 原 菌 繁 殖 圃 接 种根 据 供 试 水 稻 品 种（材 料）的 生 育 特 性，选 取 适 应 生 态 区 的 稻 瘟 病 优 势 菌 群，配 制 成 分 生 孢 子悬 浮 液，现 用 现 配。当 蒙 古 稻 幼 苗 长 至 3 叶 1 心 期 时 追 施 硫 酸 铵 1 0 0 g/m2,选 取 第 二 天 晴 天 的 傍 晚 时分 采 用 喷 雾 法 进 行 全 株 接 种，连 续 接 种 2 3 次，每 次 间 隔 1 d。接 种 完 成 后 遮 荫、保 湿，确 保 圃 内平 均 温 度 介 于 2 2 2 8，平 均 相 对 湿 度 8 0%。分 生 孢 子 悬 浮 液 的 配 制 按 照 D B 2 3/T 2 7 3 5 的 规 定执 行。5.2 抗 病 性 鉴 定5.2.1 鉴 定 圃 的 建 立选 择 土 质 肥 沃、水 源 方 便 及 遮 阴 避 风 的 旱 地 作 为 抗 病 性 鉴 定 圃，避 免 使 用 老 病 圃。鉴 定 圃 采 用旱 种 水 管,畦 高 3 0 c m，外 围 种 植 玉 米、高 粱 等 髙 秆 作 物，遮 阴 避 风,确 保 环 境 相 对 湿 度 高 于 8 0%。在鉴 定 圃 四 周 播 种 蒙 古 稻，作 为 感 染 行，每 粒 种 子 间 距 约 0.5 c m，每 1 0 份 供 试 水 稻 品 种（材 料）加蒙 古 稻 和 抗 病 对 照 品 种 各 1 份。叶 瘟 鉴 定 的 水 稻 品 种（材 料）采 用 条 播 方 式，条 深 2 c m、条 宽 2 c m、条 长 2 5 c m、条 距 8 c m，每份 水 稻 品 种（材 料）播 干 种 5 0 粒 左 右，播 种 期 和 病 原 菌 繁 殖 圃 蒙 古 稻 播 种 期 一 致。穗 颈 瘟 鉴 定 的 水 稻 品 种（材 料）采 用 插 秧 方 式，具 体 操 作 同 大 田 生 产，播 种 期 在 4 月 1 5 日。选取 生 产 上 多 年 表 现 稳 定 的 抗 病 品 种 1 0 份，感 病 品 种 1 0 份 随 机 加 在 穗 颈 瘟 鉴 定 圃 内。5.2.2 鉴 定 圃 的 施 肥 管 理叶 瘟 鉴 定，3 叶 期 追 施 硫 酸 铵 2 0 0 g/m2,床 土 水 分 达 饱 和 状 态。穗 颈 瘟 鉴 定，接 种 前 7 d 再 次 追 施 硫 酸 铵 2 0 0 g/m2。5.2.3 鉴 定 圃 接 种当 病 原 菌 繁 殖 圃 的 蒙 古 稻 8 0%叶 片 产 生 典 型 病 斑 时,将 带 病 的 蒙 古 稻 连 根 带 土 移 植 到 鉴 定 圃 感染 行（蒙 古 稻）中 间,形 成 对 感 染 行 的 再 次 侵 染，然 后 自 然 传 染 供 试 水 稻 品 种（材 料）。5.3 病 情 调 查5.3.1 调 查 时 间叶 瘟 鉴 定 在 接 种 后 7 d 9 d，感 染 行 蒙 古 稻 全 部 发 病 时 进 行 第 一 次 调 查，连 续 调 查 2 次，每 次 调查 间 隔 7 d。穗 颈 瘟 鉴 定 在 接 种 后 1 4 d 1 8 d，感 染 行 蒙 古 稻 全 部 发 穗 颈 瘟 时 进 行 第 一 次 调 查，连 续 调 查 2次，每 次 调 查 间 隔 1 0 d。D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 235.3.2 调 查 方 法叶 瘟 按 病 情 分 级 标 准 进 行 调 查、记 录。同 株 水 稻，只 记 录 发 病 最 严 重 叶 片 的 发 病 级 别；同 一 水稻 品 种（材 料），只 记 录 发 病 最 严 重 植 株 的 发 病 级 别，结 果 记 入 表 A.1 中。穗 颈 瘟 按 病 情 分 级 标 准 进 行 调 查、记 录，同 时 调 查 每 个 水 稻 品 种（材 料）和 所 有 对 照 品 种 的 抽穗 期。同 株 水 稻，只 记 录 穗 颈 瘟 发 病 最 严 重 分 蘖 的 发 病 级 别；同 一 水 稻 品 种（材 料），只 记 录 穗 颈瘟 发 病 最 严 重 植 株 的 发 病 级 别，结 果 记 入 表 A.1 中。5.3.3 病 情 分 级 标 准叶 瘟 病 情 按 以 下 标 准 分 级：0 级：全 叶 片 无 病。1 级：叶 片 上 有 针 尖 大 小 的 褐 色 坏 死 斑。2 级：叶 片 上 有 较 大（直 径 1 m m 2 m m）的 褐 色 坏 死 斑，但 无 典 型 的 病 斑。3 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，病 斑 面 积 比 例 2%。4 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，2%病 斑 面 积 比 例 5%。5 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，5%病 斑 面 积 比 例 1 0%。6 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，1 0%病 斑 面 积 比 例 2 5%。7 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，2 5%病 斑 面 积 比 例 5 0%。8 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，5 0%病 斑 面 积 比 例 7 5%。9 级：有 典 型 的 稻 瘟 病 病 斑，病 斑 面 积 比 例 7 5%。叶 瘟 病 情 分 级 按 照 N Y/T 3 6 8 5 的 规 定 执 行。穗 颈 瘟 病 情 按 以 下 标 准 分 级：0 级：整 穗 无 穗 颈 瘟、枝 梗 瘟 和 谷 粒 瘟；1 级：仅 有 谷 粒 瘟，发 病 子 粒 比 例 2%；2 级：仅 有 谷 粒 瘟，2%发 病 子 粒 比 例 5%；3 级：有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟，5%产 量 损 失 率 1 0%；4 级：有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟，1 0%产 量 损 失 率 2 0%；5 级：有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟，2 0%产 量 损 失 率 3 0%；6 级：有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟，或 穗 颈 瘟，3 0%产 量 损 失 率 5 0%；7 级：有 谷 粒 瘟 和 枝 梗 瘟，或 穗 颈 瘟，5 0%产 量 损 失 率 6 0%；8 级：仅 有 穗 颈 瘟，6 0%产 量 损 失 率 7 0%；9 级：仅 有 穗 颈 瘟，产 量 损 失 率 7 0%。穗 颈 瘟 病 情 分 级 按 照 D B 2 3/T 2 7 3 5 的 规 定 执 行。6 评 价 标 准6.1 接 种 有 效 性 评 价当 感 病 对 照 品 种 蒙 古 稻 的 叶 瘟 或 穗 颈 瘟 发 病 典 型 且 完 全 时，视 为 接 种 有 效。6.2 调 查 数 据 登 记 与 计 算将 2 次 田 间 调 查 数 据 取 最 高 值，确 定 每 个 水 稻 品 种（材 料）叶 瘟 或 穗 颈 瘟 的 最 终 发 病 级 别，登记 到 表 A.1 中。D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 246.3 抗 病 性 评 价抗 叶 瘟 潜 力 评 价：将 供 试 水 稻 品 种（材 料）最 高 发 病 级 别 与 对 照 品 种 最 高 发 病 级 别 的 比 值 作 为评 价 抗 叶 瘟 能 力 的 标 准，比 值 越 低，抗 病 性 越 强。抗 穗 颈 瘟 能 力 评 价：以 抽 穗 期 为 横 坐 标（X 轴），发 病 级 别 为 纵 坐 标（Y 轴），1 0 个 抗 病 对 照品 种 的 坐 标 在 X-Y 平 面 上 形 成 点 状 分 布，连 接 各 点 形 成 抗 病 标 准 曲 线，依 此 原 理 形 成 感 病 标 准 曲 线。如 果 供 试 水 稻 品 种（材 料）的 坐 标 位 于 抗 病 标 准 曲 线 之 下，判 断 为 抗 病 材 料（R）；如 果 坐 标 位 于 感病 标 准 曲 线 之 上，判 断 为 感 病 材 料（S）；如 果 坐 标 位 于 两 条 标 准 曲 线 之 间，判 断 为 中 抗 材 料（M R）。7 技 术 档 案建 立 旱 晚 播 水 稻 稻 瘟 病 活 体 接 种 抗 病 性 鉴 定 技 术 档 案，包 括 环 境 条 件、鉴 定 方 法、评 价 标 准 及试 验 数 据 等。D B 2 3/T 3 0 7 8-2 0 2 25附 录 A资 料 性 附 录水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查A.1 水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查 见 表 A.1 和 A.2。表 A.1 水 稻 稻 瘟 病 田 间 调 查 记 录 表调 查 时 间：水 稻 品 种（材 料）名 称：生 育 期：重复叶瘟发病级别 穗颈瘟发病级别第一次调查 第二次调查 最高值 第一次调查 第二次调查 最高值重复 I重复 I I重复 I I I