ICS 65.020.30 B 41 DB4201 武汉市地方标准 DB4201/T 593 2019 猪口腔液 样品采集 技术规范 武 汉 市 市 场 监 督 管 理 局 发布 2019-12-15 发布 2020-01-15 实施 DB4201/T 5932019 I 前 言 本规范 按照GB/T 1.1-2009 标准 化工 作导 则 第1部分:标 准的 结构 和编 写 给 出的规 则起 草。本规范 附录A 和 附录B 为资 料性附 录。本规范 由武 汉市 动物 疫病 预防控 制中 心提 出。本规范 由武 汉市 农业 农 村 局归口。本规范 起草 单位：武 汉市 动物 疫 病预 防控 制中 心、黄陂区 动物 疫病 预防 控制 中心。本规范 主要 起草 人：张四 化、尹 伟力、王 雪、阮征、赵静、刘 开武、万 云、岳龙、倪杨 帆、吴薇、白莲英、宫 时玉。本规范 首次 发布。DB4201/T 593 2019 1 猪 口腔液 样品采集 技术规 范 1 范围 本规范 规定 了猪 口腔 液样 品采集 的 采 样前 准备、样品 采集 技术、采样 登记、样品的 标记 与包 装、样品的保存 与 运输。本规范 适用 于武 汉市 动物 防疫机 构技 术人 员及 养殖 企业技 术人 员开 展 猪 口腔 液 采集 工作。2 规范性 引用 文件 下列文 件对 于本 文件 的应 用是必 不可 少的。凡 是注 日期的 引用 文件，仅 所注 日期的 版本 适用 于 本 文件。凡 是不 注日 期的 引用 文 件，其最 新版 本（包括 所有的 修改 单）适用 于本 文件。NY/T 3075 畜 禽养 殖场 消 毒技术 DB4201/T 540 重要 动物 疫病监 测样 品采 集技 术规 范 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 猪口腔 液 猪口腔 中的 唾液 以及 通过 口腔黏 膜和 齿龈 沟进 入口 腔的血 清渗 出液 组成 的混 合液体。适 用于 猪 口 蹄疫、猪 蓝耳 病、猪圆 环病 毒病等 疫病 的抗 体或 病原 检测。3.2 采样 按照规 定的 程序 和要 求从 动物及 其产 品或 环境 取得 样品的 过程。4 采样前 准备 4.1 采集用 品 4.1.1 一般要 求 采集绳、自 封袋、剪 刀、离心管（1.5 mL 以上 规格）等。4.1.2 采集绳 选择 选择100%纯 棉、直径1.5 cm 2 cm的 绳子，长 度根 据猪栏 高度 剪取，建 议长 度 1.0 m 1.2 m。4.1.3 灭菌 DB4201/T 593 2019 2 棉绳、剪刀、离心 管 使 用前 应作灭 菌处 理，棉绳 装入 无纺布 布袋 或棉 布袋，剪 刀、离 心管 装入 铝盒，121 高压 蒸汽 灭菌30 min，65 烘 箱中 烘干，将 棉绳转 入无 菌自 封袋 保存。4.1.4 采集绳 数量 4.1.4.1 猪饲养 数量 在 25 头 以内 的 栏舍，悬挂 一根 棉绳；4.1.4.2 猪饲养 数量 大 于25 头的 栏 舍可适 当增 加棉 绳数 量，绳子间 的距 离不 低 于40 cm。4.2 防护用 品 一次性 口罩、手 套、防 护 服、鞋 套，消毒 液、医疗 废弃物 垃圾 袋等。4.3 记录用 品 记号笔、黑 色中 性笔、标 签纸、采样 登记 表、样品 编号表 等。4.4 保存运 输用 品 采样运 输箱、冰 袋、防震 材料等。5 样品 采 集技 术 5.1 采样 注 意事 项 5.1.1 个人安 全防 护和 消毒 隔离 规程按 照 NY/T 3075 的要 求执行。5.1.2 每采集 一份 样品，更 换一 套一次 性采 样用 品，避免 交叉污 染。5.1.3 采样后 的废 弃物 等按照 相 关的法律 法 规进 行无 害化 处理。5.2 采集时 间 宜在猪 较为 活跃 的上 午采 集，在 采食 前或 采食 半小 时后采 集。5.3 采集绳 预处 理 若猪啃 咬棉 绳的 意愿 不强 烈，可 在棉 绳上 喷洒 无菌 糖溶液。5.4 采集步 骤 5.4.1 棉绳悬 挂 将棉绳 悬挂 于猪 栏 内 相对 干净的 区域，远 离饲 喂、饮水 和 排便 区，不接 触墙 壁和猪 栏。5.4.2 棉绳固 定 棉绳上 端打 结固 定，下端 悬挂高 度与 猪身 肩关 节齐 平。5.4.3 棉绳放置 时间 棉绳放 置45 min，任 猪自 由咀嚼。5.4.4 口腔液 收集 DB4201/T 593 2019 3 戴上一 次性 无菌 手套，将 棉绳下 端的 湿润 部分 放入 一次性 无菌 自封 袋中，用 力挤压 袋内 棉 绳，释放口腔液 至袋 底。剪掉 自封 袋底部 一角，将 口腔 液转移 至离 心管 中备 用，液体 量1 mL 为有 效采 集量。5.4.5 废弃物 处理 取下棉 绳 与 其他 废弃 物，装入医 疗废 弃物 垃圾 袋，按相关 的法律 法 规 进 行无 害化处 理。6 采样登 记 6.1 填写 猪口 腔液 采样 登记 表（见附录 A）和 样 品编号 表（见 附录 B），一式 二份。6.2 表格应用 黑 色中 性 笔 逐项 填写，信息 准确，字 迹工 整、清 晰。6.3 将两张 表格 装在 透明 自封 袋 中，一份 随样 品送 实验 室，另 一份 留存 备案。7 样品的 标记 与包 装 7.1 根据口 腔液 液体 量及 检测 目的选 择不 同规 格的 离心 管，液 体容 量不 可超 过离 心管容 量 的 2/3。装入口腔 液后 盖上 管盖，用 封口膜 固封。7.2 用记号 笔在 离心 管管 盖和 管壁上 作好 标记，以 阿拉 伯数字 标识，并 在 样品 编号表 填 写样 品编号对应 的栏 舍编 号。7.3 不同栏 舍的 口腔 液样 品不 要混样，同 一场 点 采 集的 样品置 于同 一自 封袋 中，在袋外 粘贴 标签，标签应 注 明采 样场 点、采样 日期、样品 名称 和数 量等。7.4 自封袋 上贴 封条，封 条上 应有采 样人 签章，并 注明 贴封日 期。8 样品的 保存 与运 输 8.1 口腔液 采集 后，24 h 内 可 送抵实 验室 的，置于 采样 运输箱 内运输，放冰 袋维 持箱内 温度 处于 2 8，加 填防 震材 料避免 样品 晃动；24 h 内 不能送 检的，-20 以下 温度冻 存，详细 参照 DB4201/T 540 中10.1 和10.2 规 定执 行。8.2 采样运 输箱 应完 整无 损，密封不 漏液，必 要时 经清 洁、灭 菌后 使用，详 细参 照 DB4201/T 540 中9.1 规 定 执行。8.3 样品运 送应 符合 生物 安全 要求，详细 参 照DB4201/T 540 中 10.5 规 定执 行。DB4201/T 593 2019 4 A A 附 录 A（规范 性附 录）猪口腔 液采 样登 记表 表A.1 给出 了猪 口腔 液采 样 登记表 表样。表A.1 猪口腔 液采 样登 记表 采样单位：采样时间：采样人：联系 电话：填 表人签字：*场 点名称*联 系人*联 系电话*地 址 区 街（乡）村*地 理坐标 经度：纬度：*场 点类型 种猪场 商品代养猪场 散养户 生猪屠 宰场 采 样数量 基本 情况*现存栏数 年出栏数 种公畜数 母畜数 生产：后备：样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 备注 免 疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗*伪狂 犬 是 否 弱毒苗 灭活苗*蓝耳 病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱 毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 免 疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗*伪狂 犬 是 否 弱毒苗 灭活苗*蓝耳 病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱 毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 样品 情况 序号 样品编号（起止）养殖阶段 群体数量 免 疫情况 疫苗 是否免疫 疫苗类型 最后一次免疫时间*O 型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*型口蹄 疫 是 否 灭活苗 合成肽苗*猪瘟 是 否 脾淋苗 细胞苗*伪狂 犬 是 否 弱毒苗 灭活苗*蓝耳 病 是 否 普通型灭活苗 普通型弱 毒苗 高致病性灭活苗 高致病性弱毒苗 其他 是 否 注1：地理坐标，要求填写 6 位数（必 须填写）。注2：样品编号：以例如 1 10 的简 单阿拉伯数字标识在采样管上。注3：养殖阶段：哺乳仔猪、保育猪、育肥猪、生产母猪、后备母猪、种公猪。注4：该表格一式两份。DB4201/T 593 2019 5 B B 附 录 B（资料 性附 录）样品编 号 表 表B.1 给出 了样 品编 号表 表 样。表B.1 样品编 号表 场 点名称：采样人：联 系 电话：采样时 间：样 品编号 栏 舍编号 样 品编号 栏 舍编号 样 品编号 栏 舍编号 注：该表格一式两份。填 表人签字：_