ICS 67.080 CCS B 31 3415 六安市地方标准 DB 3415/T 53 2023 金寨桑黄 菌种及菌 段制作技 术规程 2023-11-07 发布 2023-11-07 实施 六安市市 场监督 管 理局 发 布 DB 3415/T 53 2023 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标准 化工 作导则 第1 部分：标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。请注意 本文 件中 的某 些内 容可能 涉及 专利。本 文件 的发布 机构 不承 担识 别专 利的责 任。本文件 由 金 寨县 中药（西 山药库）产 业发 展中 心 提 出。本文件 由 六 安市 农业 农村 局 归口。本文件 起草 单位：金 寨县 中药（西山 药库）产 业发 展中心、金 寨尚 臻生 物科 技有限 公司、安 徽 省 食用菌技 术协 会、六安 市食 品药品 检验 中心。本文件 主要 起草 人：陆 本 坤、秦绍 新、杜 继甫、王 泰金、张 英武、朱汉 麟、邓传奇、万和 炎、徐紫娟、宋 宇、陆洋、王 琨、魏新宇、周 礼玲、张 新芹、王雷。DB 3415/T 53 2023 1 金 寨桑黄 菌种及菌 段制作 技术规程 1 范围 本文件 规定 了桑 黄栽 培过 程中菌 种及 菌段 制作 的术 语和定 义、菌种 制作 及菌 段制作 技术、接 种 的 要求。本文件 适用 于桑 黄各 级菌 种及段 木栽 培菌 段的 制作。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中 的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB 5749 生活 饮用 水卫 生 标准 GB/T 26373 醇 类消 毒剂 卫生要 求 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 金寨桑 黄 Jinzhai phellinus igniarius 以金寨 县内 野生 桑黄 作为 原种，经过 人工 多年 连续 选育的 菌株，金 寨县 内生 产的桑 黄。4 菌种制 作 菌株来 源 4.1 应使用 经专 业机 构鉴 定的 锈革孔 菌科 桑黄 孔菌 属瓦 尼桑黄，Sanghuangporus vaninii(Ljub.)L.W.Zhou&Y.C.Dai。生产用 水 4.2 应符合GB 5749 的要 求。乙醇消 毒剂 4.3 应符合GB/T 26373 的 要求。菌种制 备 4.4 4.4.1 工艺流 程 制作工 艺流 程见 图1。DB 3415/T 53 2023 2 图1 工艺流 程图 4.4.2 培养基 配方 母种培 养基 配方、原 种培 养基 配 方和 栽培 种培 养基 配方 见 规范 性附 录A。4.4.3 分装 母种用 试管 分装，原 种、栽培种 用瓶 或袋 分装。4.4.4 灭菌 母种高 压灭 菌30 min，原 种、栽 培种 高压 灭菌4 h。4.4.5 冷却 灭菌结 束后，趁热 将母种 试管摆 放在操 作台 面上，斜面长 度为试 管的2/3，将 原种、栽培种 取出 置于净化 冷却 区域 冷却 至室 温。4.4.6 接种操作 4.4.6.1 母种 挑选生 长两 年、长 势优 良、形状 规则、边缘 有淡黄 色组织 的桑 黄子 实体 做为 种菇，用体积 分数75%的酒精 浸泡5 min 后 放置 在 洁净的 培养 皿中，点 火灼 烧 至酒精 燃烧 完毕，将 解剖 刀 在酒精 灯上 灼烧 消毒，然后在 桑黄子 实体 表面划 一圈，深度1 cm2 cm，沿 刀口掰 开子实 体，将解剖 刀在酒 精灯上 灼烧 消毒，冷却后 挑取 桑黄 淡黄 色组 织的中 心部 位，切成3 mm 3 mm 小块 后用 接种 针取 一块接 种于 斜面 试管。4.4.6.2 原种 接种前 一天 将母 种检 查准 备好，接 种时 再核 对确 保 无误。严 格按 照无 菌操 作 要求，将 接种 工具 在酒精灯灼 烧灭 菌，冷却 后挑 取试管 中菌 块10 mm 10 mm 到菌袋（瓶）中，每 支母 种接原 种6 至8袋（瓶）。4.4.6.3 栽培种 接种前 一天 将原 种检 查准 备好，接 种时 再核 对确 保 无误。严 格按 照无 菌操 作 要求，将 接种 工具 在酒精灯灼 烧灭 菌，冷 却后 挑 取5 g 6 g 块状 原种 到菌 袋（瓶）中，每 袋（瓶）原 种 接栽培 种60 至80 袋（瓶）。4.4.7 培养 4.4.7.1 母种培 养 将斜面 试管 置于28 培养2 周，至 菌丝 布满 培养 基，选取无 杂菌 试管 菌株。DB 3415/T 53 2023 3 4.4.7.2 原种和 栽培 种培 养 接种后 将菌 种 袋（瓶）置 于282 培 养室 内避 光 培养约50 d 60 d，当菌 丝 长满袋（瓶）后 继续培养5 d 10 d，进入 后熟 阶段，菌丝 轻微 变黄 方可 用于生 产。5 菌段制 作 木段制 备 5.1 取栎类、桑树 等树 木，锯 成16 cm 20 cm 长 度的短 段 木，并 对尖锐 部分 以及树 结进行 修整，使之 圆滑平整，选 择直 径12 cm 22 cm的 段木 放入 水槽 中使 用2%饱 和石 灰水 浸泡3 d 5 d，将浸 泡完 毕的 段木 捞出竖直 放置 在制 段台 面上，选择 大小 合适 的栽 培袋 装入木 段，袋口 弯折 一次，扎紧 袋口，放 入筐 中。灭菌 5.2 5.2.1 高压灭 菌 高压灭 菌段 木14 h16 h。灭菌结 束后 经自 然冷 却至50 时 出锅，搬 运至 冷却 室 或接种 室备 用。5.2.2 常压灭 菌 常压灭 菌段 木40 h48 h。灭菌结 束后 经自 然冷 却至50 时 出锅，搬 运至 冷却 室 或接种 室备 用。接种 5.3 5.3.1 菌种选 择 选用 适 龄菌 种，菌丝 淡黄 色至黄 色、粗壮、匍 匐状、生长 好、无杂 菌、无萎 缩离壁 现象。5.3.2 接种方 法 按照无 菌操 作方 法进 行接 种。5.3.3 接种量 每袋栽 培种 接8 至12 袋段 木。培养 5.4 避光，温度 宜控 制在26 28，湿 度50%RH 60%RH，培 养时 间150 d。DB 3415/T 53 2023 4 A A 附录A（规范 性）培养基 配方 A.1 母种培 养基 配方 母种培 养基 配方 见表A.1。表A.1 母种培 养基 配方 项目 用量 土豆粉 10 g 葡萄糖 20 g 桑树粉 20 g 琼脂 20 g 水 1000 mL A.2 原种培 养基 配方 原种培 养基 配方 见表A.2。表A.2 原种培 养基 配方 项目 占比 木屑 78%麸皮 20%石膏粉 1%生石灰 1%A.3 栽培种 培养 基配 方 栽培 种 培养 基配 方见 表A.3.表A.3 栽培 种 培养 基配 方 项目 占比 木屑 78%麸皮 20%石膏粉 1%生石灰 1%